產品信息：
| 貨號 | CS-X2002 | 種屬 | 人 |
| 生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
| 溫度 | 液氮 | 培養條件: | 氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃ |
| 鑒定 | STR鑒定正確 | 生長培養基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
商品介紹：
產品名稱：5637 (人膀胱癌細胞) 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率：2-3次/周 注意事項該細胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細胞收縮變圓，輕拍培養瓶側邊，細胞可以滑落方可終止消化。 參考資料(來源文獻) 背景描述5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 年齡（性別）男性；68歲 組織來源膀胱；癌 細胞類型腫瘤細胞 腫瘤類型膀胱癌細胞 生物安全等級BSL-1 倍增時間~24-36 hours 致瘤性Yes, within 21 days at frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 保藏機構ATCC; HTB-9 DSMZ; ACC-35 |
細胞保存方法：
（一）細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4. 離心1000rpm，5min；
5. 去除，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
注意事項：
1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3）、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。
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操作步驟：
1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基，使細胞處于指數生長期。
2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。
3）、離心收集培養之細胞，用加血清的培養基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
