1、適用范圍:
本方法適用于(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號)等油溶性非食用色素的現場快速檢測。
2、樣品處理:
取約1克樣品于容器中,加入2ml純凈水或蒸餾水,加入2~4 ml乙酸乙酯(環己烷、正己烷等有機溶劑都可以),充分震蕩1分鐘以上,靜置3分鐘以上。如果下層(水層)洗脫液有顏色,說明樣品中含有水溶性色素,可選用水溶性非食用色素速測盒加以檢測;如果上層(有機溶劑層)洗脫液有顏色,說明樣品中含有油溶性色素,需要繼續往下操作。
3、點樣:
取一張層析紙,在端底向上約25px處、平行相隔約25px、用鉛筆畫出將要點樣的+字線或五個小點。取1支毛細管沾取樣品上層(有機溶劑層)洗脫液,將其點在1號+字線上(樣品溶液顏色較淺時,可多次間斷性重復點樣,點樣斑點直徑控制在5毫米以內)。另取四支毛細管分別沾取1、2、3、4號對照液少許依次分別點在其它+字線上。
4、展開:
取一個250ml以上的燒杯,加入約5ml展開劑,將層析紙(樣品端朝下)插入展開劑中靠在杯壁上,待展開劑延層析紙向上平行展開至層析紙頂端約1厘米處時取出層析紙。
5、結果判斷:
如果樣品在層析紙展開軌跡中出現斑點,其斑點展開(向上跑)的距離與某一對照液展開后的斑點距離相等、顏色相同或顏色雖淺卻相近時,即可判斷樣品中含有這一色素。
6、說明:
6.1 本方法檢出限為點樣量10 ul , 0.08 ug 目視可見;檢出濃度8 ug /ml。精確定量需要采用高效液相色譜儀。
6.2 檢測的樣品數量較多時,不必每張層析紙上都點對照液,可一次點幾個樣品,當展開過程中出現斑點后,再做加入對照液實驗。
6.3 對照液的點樣量不要太多,以能夠展現斑點而無拖尾現象為宜。
6.4 展開劑的使用應適量,液面高度應控制在斑點以下,展開過程中層析紙不能傾倒,每展一張層析紙更換一次展開劑。
6.5 樣品展開時,燒杯上不要蓋蓋,以便于斑點的展開。當環境溫度較高,展開劑展開到層析紙一半距離不再往上展時,應重新操作并在燒杯上加蓋物品。
6.6 保質期1年,生產日期見包裝處。
7、試劑盒組成:
層析紙1袋,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號系列對照液1袋,展開劑2瓶,毛細管1管。
8、自備試材:
樣品洗脫容器,250ml燒杯,乙酸乙酯或環己烷等某種有機溶劑。