產品名稱:Good RNAiMAX Transfection Reagent 脂質體RNAiMAX 轉染試劑
產品貨號:C0170-ZX01
產品規格:0.75ML
運輸溫度:2-8℃
效 期:12個月
注意事項:禁止冷凍
產品性能:
Good RNAiMAX轉染試劑適用于廣泛的細胞類型,包括但不限于MDA-MB-435、HeLa、HT1080、A549、HepG2、MCF7、SK-N-SH等細胞系,以及干細胞和原代細胞。轉染后無需去除轉染復合物或更換/添加培養基,簡化了實驗操作流程。
操作流程:
轉染過程大多很簡單:混合核酸和轉染試劑,等幾分鐘,加到細胞中,幾天后分析。
具體步驟包括:
用Opti-MEM分別稀釋RNA分子和Good RNAiMAX,將兩者混合,室溫下孵育10-20分鐘。
加入培養細胞中,在37°C孵育24-48小時。
反向轉染是更快的操作方式,適合高通量轉染。反向轉染時,首先在孔內制備復合物,然后再將細胞和培養基添加到孔板中。
使用RNAiMAX進行轉染的優點包括:
1. 高效性:能夠有效轉染多種難轉染的細胞類型。
2. 低毒性:對細胞的毒性相對較低,適合長期實驗和敏感細胞系的轉染。
3. 易操作:轉染過程簡單,易于控制和重復。
在使用Good RNAiMAX進行轉染時,一般需要按照以下步驟操作:
1. 準備細胞:確保細胞處于良好的生長狀態,通常在轉染前24小時接種至適當的密度。
2. 制備轉染復合物:將Good RNAiMAX與siRNA或miRNA在無血清培養基中混合,形成復合物。
3. 轉染:將制備好的復合物加入到細胞培養基中,輕輕搖晃培養皿以確保均勻分布。
4. 培養:根據實驗設計,在適宜條件下培養細胞一定時間,以便觀察轉染效果。
5. 檢測:使用適當的方法檢測基因沉默的效果,如實時定量PCR、Western blot等。
轉染用量:
96孔板:siRNA最終用量為1 pmol,Good RNAiMAX轉染試劑最終用量為0.3 μL。
24孔板:siRNA最終用量為5 pmol,Good RNAiMAX轉染試劑最終用量為1.5 μL。
6孔板:siRNA最終用量為25 pmol,Good RNAiMAX轉染試劑最終用量為7.5 μL。
(24孔板的每孔建議用量為1 μl)。
注意事項:
RNAiMAX試劑在冰箱4℃保存,切記不能冷凍。
RNAiMAX試劑不宜在室溫放置過久,因此在制備轉染復合物前從冰箱拿出,加完后應立即放回4℃再進行后續操作。
轉染復合物制備完成后室溫孵育時間不得超過20分鐘。
通過以上信息,您可以更好地了解Good RNAiMAX轉染試劑的特點和使用方法。
需要注意的是,使用Good RNAiMAX進行轉染時,要嚴格遵循制造商提供的說明書,以獲得佳的轉染效率和減少細胞損傷。此外,每次實驗前好進行預實驗,以確定佳的siRNA或miRNA濃度和轉染條件。
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