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PCR具有以下特點：

靈敏：配合推薦使用的核酸抽提方案，檢測靈敏度達到 10CFU/ml。

可靠：抽提加入內標核酸，全過程質量控制。

穩定：全程閉管操作，無交叉污染。

方便：操作簡單，無需電泳步驟。特點

1. 內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2. 高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3. 高靈敏度，檢測限可達到≤10CFU/ml。

4. 有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

5. 有相應配套的支原體定量標準品，便于最后定量檢測。

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

操作步驟：

第1步：樣本處理

a.細胞培養上清

說明：

①樣品基質可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶，在低溫下也能降解支原DNA，影響檢測靈敏度。

建議：樣本做DNA抽提處理，實現靈敏度。

第2步：試劑制備

a. 凍干粉溶解

b. 反應體系制備 b1) 樣品為細胞上清篩查——反應體系制備

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