加入硫酸終止液可以將顏色變為黃色，從而通過使用分光光度計或酶標儀在 450 nm 處實現準確的強度測量。該特定配方用于大多數 Thermo Scientific Pierce ELISA 試劑盒，從而可以為三明治 ELISA 技術提供一致的性能。

TMB 底物溶液的特點：

•產品編號：N301
• 規格：100 mL（足夠用于約 10 個 96 孔微孔板）
• 儲存：置于冷袋上運輸。接收后立即在 2-8°C 下儲存。請勿使用超過失效日期的產品。
•應用：ELISA：推薦用于基于過氧化物酶的免疫檢測。氧化后，TMB 形成一種水溶性藍色反應產物，可以通過分光光度法在 605 nm 處測量。酸化后，反應產物變為黃色，吸光度峰位于 450 nm。
•注意事項：本產品對來自各種氧化劑的污染敏感。為了避免污染和過早失效，請避免將 TMB 溶液接觸任何潛在的污染來源。切勿直接用移液器從瓶中吸取。將所需量倒入試管中并用移液器從試管中吸取。不要將多余的 TMB 倒回初級儲存容器。

程序：
•向每個含過氧化物酶反應液的孔中加入 100 µL TMB 底物。
•室溫孵育 15 至 30 分鐘。
•向各孔中加入 100 µL 終止液（0.16 M 硫酸，N600）。
•在 450 nm 處測量吸光度。