Ex (nm) | 354 | Em (nm) | 441 |
分子量 | 321.28 | 溶劑 | DMSO |
存儲條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
鈣黃綠素藍 CAS 54375-47-2 細胞活力測定是美國AAT Bioquest生產的用于細胞活力測定的試劑,它具有與鈣黃綠素類似的鈣結合特性。像鈣黃綠素一樣,它通常用于用EDTA對金屬離子進行金屬致變色滴定。此外,它還用作基于細胞的測定中鈣黃綠素AM的參考標準。百螢生物是AAT Bioquest 的中國代理商,為您提供優質的鈣黃綠素藍 CAS 54375-47-2 細胞活力測定。
使用細胞活力指標AM酯類
AM酯是非極性酯,其易于穿過活細胞膜,并且通過活細胞內的細胞酯酶快速水解。 AM酯廣泛用于非侵入性地將各種極性熒光探針加載到活細胞中。 但是,使用AM酯時必須小心,因為它們易于水解,特別是在溶液中。 它們應在使用前重新配制成高質量的無水二甲基亞砜(DMSO)。 DMSO儲備溶液可以在20℃下干燥儲存并避光。 在這些條件下,AM酯應穩定數月。
以下是我們推薦的將AM酯加載到活細胞中的方案。 該說明書僅提供指南,實際應根據您的具體需求進行修改。
a)在高質量無水DMSO中制備2至5mM AM酯的儲備溶液。非離子洗滌劑Pluronic®F-127有時用于增加AM酯的水溶性。
注意:在稀釋到上樣緩沖液中之前,可將等體積的20%Pluronic®F-127溶液添加到細胞活力指示劑的DMSO儲備溶液中。終的Pluronic®F-127濃度約為0.02%。
注意:不建議在Pluronic®F-127存在下長期儲存AM酯。
b)在實驗當天,要么將細胞活力的固體指示劑溶解在DMSO中,要么將等分的指示劑儲備溶液解凍至室溫。在您選擇的緩沖液(如Hanks和Hepes緩沖液)中制備1至10μM的工作溶液。對于大多數細胞系,建議終濃度范圍為4至5μM的細胞活力指標。細胞加載所需指標的確切濃度必須根據經驗確定。
c)如果您的細胞含有有機陰離子轉運蛋白,可以在細胞培養基中加入丙H舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以減少脫酯化指標的泄漏。在室溫或37℃下將細胞與AM酯孵育20分鐘至1小時。
d)在不含細胞活力指示劑的緩沖液(含有陰離子轉運蛋白抑制劑,如果適用)中洗滌細胞以除去過量的探針。
注意:通過流式細胞術立即分析細胞樣品,以確定在零時間沒有洗滌的每個細胞的平均熒光。
e)在所需的Ex / Em波長下進行實驗 。
選擇指南
Dye | Calcein Blue | CytoCalcein™ Violet 450 | Calcein UltraBlue™ | CytoCalcein™ Violet 500 | Calcein UltraGreen™ | Calcein | Calcein Orange™ | Calcein Red™ | Calcein Deep Red™ | |
原理 | 在活細胞中,非熒光鈣黃綠素 AM 在細胞內酯酶的作用下 AM 酯水解后轉化為熒光鈣黃綠素產物。 | |||||||||
熒光效果 | 活細胞具有高度熒光,很容易與無熒光的死細胞區分開。 | |||||||||
Laser(nm) | UV (350) | Violet (405) | UV (350) | Violet (405) | Blue (488) | Blue (488) | Green (532) | Yellow (561-568) | Red (633-647) | |
Ex/Em(nm) | 354/441 | 406/445 | 359/458 | 420/505 | 492/514 | 501/521 | 531/545 | 562/576 | 643/663 | |
是否復用 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | |
染料相容性 | 與綠色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與綠色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與綠色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與藍色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與藍色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與藍色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與藍色和紅色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與藍色和綠色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | 與藍色和綠色熒光蛋白、指示劑和其他探針兼容 | |
樣品類型 | 活細胞 | |||||||||
適用儀器 | 熒光顯微鏡、熒光酶標儀、流式細胞儀 | |||||||||
貨號 | 22007 | 22012 | 21908 | 22013 | 21905 | 22003 | 22009 | 21900 | 22011 | |