Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 流式細胞分析檢測試劑盒用于分析增殖細胞中的 DNA 復制,是一種較傳統 BrdU 法更簡單、更可靠的檢測方法。采用流式細胞儀的 647 nm 激光分析新合成的 DNA。Click-iT® Plus 配方與標準熒光基團(包括 R-PE、R-PE 串聯體以及熒光蛋白)兼容。
?可聯用—可與 R-PE(和串聯體)及熒光蛋白兼容
?準確—檢測結果優于 BrdU 檢測
?快速—可在短短 60 分鐘內獲得結果
查看流式細胞分析所有 Click-iT™ EdU 和 Click-iT™ Plus EdU 檢測的選擇指南。
可聯用
與初代 Click-iT® EdU 流式細胞分析檢測相比,Click-iT Plus® 配方具有更好的聯用性。Click-iT® Plus EdU 檢測可與 R-PE 和 R-PE 串聯體,以及各種熒光蛋白(如 GFP 和 mCherry)配合使用,同時還具有初代 Click-iT® EdU 檢測準確、快速的特點。
更出色的 BrdU 替代方法,提供更優結果
更準確的增殖分析方法,可直接測量 DNA 合成。最初,這是通過摻入放射性核甘酸來完成的。隨后基于抗體的溴脫氧尿苷(BrdU,核苷類似物)法取代了這種檢測方法。Click-iT® Plus EdU 流式細胞分析檢測是替代 BrdU 檢測的新方法。EdU(5-乙炔基-2′-脫氧尿苷)是胸苷類似物,可在活躍的 DNA 合成過程中摻入 DNA 中。檢測基于點擊化學,在銅催化反應中,炔與染料標記的疊氮化物反應,形成穩定的共價鍵。在該應用中,在 EdU 的乙炔基團中發現了炔烴,而疊氮化物偶聯至 Alexa Fluor® 染料。標準流式細胞分析方法用于檢測細胞群中 S 期細胞的百分比。
溫和條件,可與細胞周期染料和抗體配合使用
小型疊氮染料,可使用溫和條件高效檢測摻入的 EdU,同時具有足夠的基于醛的標準固定和去污劑透化能力,可用于 Click-iT® Plus 檢測試劑,以獲得 DNA。這與 BrdU 檢測相反,BrdU 檢測需要使用 HCl、加熱或用 Dnase 消化變性 DNA,使 BrdU 暴露以便用抗 BrdU 抗體檢測。BrdU 法處理樣品會改變細胞周期分布,且 HCl 可破壞抗原識別位點。相比之下,易于使用的 Click-iT® Plus EdU 檢測與細胞周期染料兼容。Click-iT® Plus EdU 檢測也可與細胞表面和細胞內標記物的抗體以及標記標準熒光基團的偶聯物(包括 R-PE、R-PE 串聯體和熒光蛋白(GFP 和 mCherry)聯用。
快速簡便的方案
Click-iT® Plus EdU 方案基于免疫組化抗體標記的醛基固定和洗滌劑透化步驟。但是,EdU 與其他固定劑/透化劑(包括皂苷和甲醇)兼容。只需五步就能分析細胞增殖數據:
1.’用 EdU 處理細胞。
2.固定并透化細胞。
3.使用 Click-iT® Plus 檢測混合物檢測 S 期細胞 30 min。
4.清洗一次。
5.分析。
在某些情況下,60 分鐘內即可獲得結果,但我們建議所有應用采用 90 分鐘。
?可聯用—可與 R-PE(和串聯體)及熒光蛋白兼容
?準確—檢測結果優于 BrdU 檢測
?快速—可在短短 60 分鐘內獲得結果
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可聯用
與初代 Click-iT® EdU 流式細胞分析檢測相比,Click-iT Plus® 配方具有更好的聯用性。Click-iT® Plus EdU 檢測可與 R-PE 和 R-PE 串聯體,以及各種熒光蛋白(如 GFP 和 mCherry)配合使用,同時還具有初代 Click-iT® EdU 檢測準確、快速的特點。
更出色的 BrdU 替代方法,提供更優結果
更準確的增殖分析方法,可直接測量 DNA 合成。最初,這是通過摻入放射性核甘酸來完成的。隨后基于抗體的溴脫氧尿苷(BrdU,核苷類似物)法取代了這種檢測方法。Click-iT® Plus EdU 流式細胞分析檢測是替代 BrdU 檢測的新方法。EdU(5-乙炔基-2′-脫氧尿苷)是胸苷類似物,可在活躍的 DNA 合成過程中摻入 DNA 中。檢測基于點擊化學,在銅催化反應中,炔與染料標記的疊氮化物反應,形成穩定的共價鍵。在該應用中,在 EdU 的乙炔基團中發現了炔烴,而疊氮化物偶聯至 Alexa Fluor® 染料。標準流式細胞分析方法用于檢測細胞群中 S 期細胞的百分比。
溫和條件,可與細胞周期染料和抗體配合使用
小型疊氮染料,可使用溫和條件高效檢測摻入的 EdU,同時具有足夠的基于醛的標準固定和去污劑透化能力,可用于 Click-iT® Plus 檢測試劑,以獲得 DNA。這與 BrdU 檢測相反,BrdU 檢測需要使用 HCl、加熱或用 Dnase 消化變性 DNA,使 BrdU 暴露以便用抗 BrdU 抗體檢測。BrdU 法處理樣品會改變細胞周期分布,且 HCl 可破壞抗原識別位點。相比之下,易于使用的 Click-iT® Plus EdU 檢測與細胞周期染料兼容。Click-iT® Plus EdU 檢測也可與細胞表面和細胞內標記物的抗體以及標記標準熒光基團的偶聯物(包括 R-PE、R-PE 串聯體和熒光蛋白(GFP 和 mCherry)聯用。
快速簡便的方案
Click-iT® Plus EdU 方案基于免疫組化抗體標記的醛基固定和洗滌劑透化步驟。但是,EdU 與其他固定劑/透化劑(包括皂苷和甲醇)兼容。只需五步就能分析細胞增殖數據:
1.’用 EdU 處理細胞。
2.固定并透化細胞。
3.使用 Click-iT® Plus 檢測混合物檢測 S 期細胞 30 min。
4.清洗一次。
5.分析。
在某些情況下,60 分鐘內即可獲得結果,但我們建議所有應用采用 90 分鐘。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.