天根 KR211 miRcute增強型miRNA DNA合成試劑盒
天根 KR211 miRcute增強型miRNA DNA合成試劑盒采用加A法來進行miRNA cDNA的反轉錄。
本試劑盒采用了雙組分形式,簡化了實驗操作流程,降低了操作失誤的可能性。
試劑盒中的miRNA RT Enzyme Mix包含了E.coli Poly(A) Polymerase、RTase和RNasin,其中的E.coli Poly(A) Polymerase不但具有高*效的加A尾效率,還可特異性識別單鏈 miRNA,避免了具有雙鏈結構的miRNA前體的進一步逆轉錄反應;RTase經過分子改造,去掉了RNase H活性,增加了RNA模板親和力,從而使得miRNA的逆轉錄反應具有較高的效率和靈敏度。
試劑盒中的2× miRNA RT Reaction Buffer包含了miRNA加A尾反應和逆轉錄反應的所有原料和引物,并經過精心優化,可保證miRNA 3'末端的Poly(A)修飾過程和 逆轉錄過程同時高效進行。
染料法/探針法miRNA的熒光定量研究
圖2. 使用TIANGEN miRcute增強型miRNA cDNA鏈合成試劑盒(KR211,上排)與國外Q公司(下排)的同類產品分別反轉錄人類Total RNA,之后 用熒光定量檢測hsa-miR-122-5p。結果顯示,對于同一RNA樣本,與競品相比TIANGEN KR211具有更高的靈敏度和穩定性,更適合下游實驗。Human Huh7細胞Total RNA提取采用TRNzol Universal(DP424)。反轉錄上樣量:100 ng-1 pg;反轉錄體系:20 μl,取2 μl 定量;定量試劑:TIANGEN miRcute增強型miRNA熒光定量檢測試劑盒(SYBR Green)(FP411);使用儀器:ABI 7500 fast。
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天根的產品廣泛應用于生命科學、醫學、農業、制藥、環境等領域的基礎研究。客戶遍布大學、研究所、醫院、檢驗所、血站、出入境檢驗檢疫等單位。
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