超微量紫外可見分光光度計因為熒光分析法的靈敏度高,其檢出限通常比分光光度法低2~4個數(shù)量級,選擇性也比分光光度法好,這是由于:a 熒光分析儀器在與激發(fā)光相垂直的方向測量熒光,與分光光度在一直線上測量相比,消除了透射光的影響,測量更為準(zhǔn)確,靈敏度高;b 吸光光度法只采用一個單色器,而熒光分析儀器有兩個單色器,分別用于獲得單色性較好的激發(fā)光和分出某一波長的熒光,消除其它雜散光的干擾,其儀器的準(zhǔn)確度、
超微量紫外可見分光光度計
核酸的定量是分光光度計使用頻率高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如:1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。
測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾后測試空白液和樣品液。然而,實驗并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實驗者頭痛的問題。靈敏度越高的儀器,表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
主要特點:
● *由PC 控制操作,可靈活選配火焰、石墨爐原子化器。儀器的燈電流、負高壓、工作波長和燃燒條件均由PC機菜單輸入的高度自動化的光度計。
● 為吸光度、濃度、發(fā)射強度的測定提供連續(xù)、峰高和峰面積三種讀數(shù)方式,具有原子吸收、背景吸收、扣背景校正、發(fā)射強度四種信號方式。