訂購信息:
產品名稱:流感病毒N亞型核酸分型檢測試劑盒
規格:50T
編號:BH-P96332
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
間充質干細胞-臍帶 Human鹽酸*()Venlaine >98%,
TPST1 Others Human TPST1 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸*Venlaine >98%,BR
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3原卟啉IXProtoporphyrin IX>95%
BST2 Others Human TETHERIN / BST2 / CD317 細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸*()Ropivacaine mesylateHPLC>98%,
原代上皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells 1ml甲磺酸*Ropivacaine mesylate>98%,BR
豚鼠肺細胞;GP-F1*()HPLC>98%,Flutamide
CA14 Others Human CA14 細胞裂解液 (陽性對照) 環1酰胺>98%,一水合物USP,BRCyclophosphamide
CL-0443SK-N-MC(神經上皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2環1酰胺()HPLC>99%,Cyclophosphamide
NLGN1 Others Mouse 小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 細胞裂解液 (陽性對照) >98%,ARAmidopyrine/aminopyrine
大鼠角膜內皮細胞*培養基 100mL血管緊張素II>98.0%,BRAngiotensin II
流感病毒N亞型核酸分型檢測試劑盒HCC827(非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;CV-12,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))>96.0%(HPLC)2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline
胰腺癌細胞;AsPC-12,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 細胞裂解液 (陽性對照) 2,9-二氯-1,10-菲羅啉(>97.0%(GC)(T))>97.0%(GC)(T)2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline
MDA-MB-453 癌細胞3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline
NCI-H1650非小細胞肺癌細胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS5,5'-硫代雙水楊酸(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)5,5'-Thiodisalicylic Acid
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。