酸洗玻璃珠(直徑:100μm)
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
酸洗玻璃珠(直徑:100μm) | 10g | 詢價 |
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本產品是用濃酸充分洗滌后的玻璃珠,它是玻璃珠法破碎細菌和真菌的*成分,主要用于從具有堅硬外壁的微生物細胞(如真菌孢子、酵母細胞、結核細胞等)中提取DNA、RNA和蛋白質大分子,因為用其他方法,包括酶解方法都很難沉底破碎具有堅硬外壁的微生物細胞。本產品具有下列特點:
1. 經過充分的酸洗,免去用戶接觸具有腐蝕性的濃酸。
2. 用本產品破碎具有堅硬外壁的微生物細胞,屬于物理方法,不但比溫和的化學破壁法普適性更好、重復性更好,同時不需要使用酶,因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白質污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取一個樣品只需要10余分鐘時間,非常快捷。注意:本產品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、酸洗玻璃珠(直徑:100μm)離心吸附柱等配合使用才能用于核酸純化。
4. 一次可以處理5 mL的微生物樣品。
5. 本系列產品有各種規格、適用于不同材料。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,酸洗玻璃珠(直徑:100μm)離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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