96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊 |
96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法) | 1次 | 詢價(jià) |
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本產(chǎn)品是基于經(jīng)典堿變法的高通量質(zhì)粒DNA提取試劑盒,一次可以處理多達(dá)96個(gè)樣品,尤其適合處理量大的工業(yè)客戶,包括測序公司。本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是:
1. 高通量,一次處理96個(gè)樣品。
2. 吸附量高,一個(gè)吸附孔多可以吸附30-50 μg的質(zhì)粒DNA。
3. DNA純度高,幾乎沒有基因組DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9之間,*能滿足一般分子生物學(xué)的要求。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實(shí)驗(yàn)。
5. 重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
Ammonium Chloride(氯化銨溶液), 0.5M
Ammonium Persulfate Solution(過硫酸銨溶液),10%
Ammonium Sulfate Solution(硫酸銨溶液),1M
Ammonium Sulfate Solution, Saturated(飽和硫酸銨溶液)
AMP Buffer,0.5M,pH10.0
AMP Buffer,0.5M,pH10.5
AMP Buffer,0.5M,pH9.0