中文名稱:單細(xì)胞全基因組PCR擴(kuò)增試劑盒
英文名稱:Single Cell Whole Genome Amplification Ki
產(chǎn)品規(guī)格:10次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164635
生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
本試劑盒基于多重鏈置換擴(kuò)增的Phi29 DNA聚合酶等溫擴(kuò)增體系,Phi29 DNA聚合酶是從Bacillus subtilis噬菌體Phi29中克隆出的嗜溫DNA聚合酶,用基因重組技術(shù),在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后經(jīng)多次純化分離而得。Phi29 DNA聚合酶具有很的鏈置換活性,可實現(xiàn)對DNA復(fù)雜結(jié)構(gòu)的解鏈與復(fù)制。同時具有高效的DNA合成能力,可連續(xù)合成多達(dá)70kb的DNA片段。Phi29 DNA聚合酶具有很的3’→5’外切酶活性,保真度高于絕大多數(shù)高保真酶,因此Phi29 DNA聚合酶特別適合用于全基因組擴(kuò)增。 本試劑盒可以實現(xiàn)單個細(xì)胞或者少量樣本的全基因組無差別擴(kuò)增,一個反應(yīng)可以達(dá)到40μg的全基因組DNA。低質(zhì)量樣品會影響DNA的終產(chǎn)量,如果以DNA樣品為模板,需避免使用降解的DNA作為起始模板。 產(chǎn)品特點: 高覆蓋度:經(jīng)過擴(kuò)增后可達(dá)到95%以上的覆蓋度。 高均一度:無偏好擴(kuò)增,可實現(xiàn)全基因組的均一擴(kuò)增。 高保真:具有很的校正功能,保真度高。 高靈敏:可實現(xiàn)從單個細(xì)胞樣本的全基因組擴(kuò)增。 保存:-20℃ |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
冰凍切片脂質(zhì)尼羅紅染色試劑盒
尼羅紅(NILE RED)溶液(0.5毫克/毫升)
蛋氨肽酶(methionine aminopeptidase; aminopeptidase M)
氨肽酶B(aminopeptidase B)
氨肽酶N(aminopeptidase N)
奈比洛爾鹽酸鹽;奈必洛爾 Nebivolol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Three iodothyronine (T3) ELISA Kit 人三甲狀腺原(T3)elisa
奈必洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Nebivolol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanmembraneIgM,mIgMELISAKit 人表面膜球蛋白M(mIgM)elisa 96T/48T 進(jìn)口分裝
核固紅 Nuclear fast red 質(zhì)量規(guī)格:BS Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseBelisa人抗DNA酶B抗體(ai-DNaseB)elisa規(guī)格:96T/48T
胭脂紅 Carmine 質(zhì)量規(guī)格:BS,用于生物學(xué)染色 植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50
酚紅 Bromophenol red 質(zhì)量規(guī)格:AR Humanαmannosidase,αManaseELISAKit人β甘露糖苷酶(βManase)elisa規(guī)格:96T/48T
麗春紅2R(BS) Ponceau 2R 質(zhì)量規(guī)格:BS 小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)elisa ,英文名: CGRP ELISA Kit
孟加拉玫瑰紅,酸性紅94 Rose bengal 質(zhì)量規(guī)格:AR 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISAKit 96T/48T
偶氮熒光桃紅,酸性紅1 Azophloxine 質(zhì)量規(guī)格:BS 人雌酮(esone,E1)試劑盒 Human esone,E1 ELISA kit
曙紅Y,醇溶劑紅 43 Eosin Y ,alcohol solution 質(zhì)量規(guī)格:AR Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa規(guī)格:96T/48T
曙紅B Eosin B 質(zhì)量規(guī)格:BS HVA高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20
單細(xì)胞全基因組PCR擴(kuò)增試劑盒二氫異丹參酮I HPLC≥98% 20mg RatAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa規(guī)格:96T/48T
()鷹爪豆堿 HPLC≥98% 20mg Ratai-gonadoopin-releasinghormonereceptoraibody,GHR-AbELISAKit大鼠釋放激素受體抗體(GHR-Ab)elisa規(guī)格:96T/48T
旋覆花內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg Ratai-IgEreceptoraibodyELISAKit大鼠抗IgE受體抗體elisa規(guī)格:96T/48T
靈芝酸N HPLC≥98% 20mg Ratai-IVIgGaibodyELISAKit大鼠抗IVIgG抗體elisa規(guī)格:96T/48T
靈芝酸Y HPLC≥98% 20mg Ratai-Monocyteaibody,AMAELISAKit大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)elisa規(guī)格:96T/48T
靈芝酸Z HPLC≥98% 20mg Ratai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAbELISAKit大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)elisa規(guī)格:96T/48T
靈芝酸AM HPLC≥98% 20mg RatAi-myocardialaibody,AMAELISAKit大鼠抗心肌抗體(AMA)elisa規(guī)格:96T/48T
靈芝酸LM HPLC≥98% 20mg Ratai-redcellaibodyELISAKit大鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)elisa規(guī)格:96T/48T
靈芝酸TN HPLC≥98% 20mg RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa規(guī)格:96T/48T
丹芝酸A HPLC≥98% 20mg Ratai-spermaibody,AsAbELISAKit大鼠抗抗體(AsAb)elisa規(guī)格:96T/48T