生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱(chēng):第一鏈cDNA合成試劑盒(去除gDNA)
英文名稱(chēng):BalbScript First Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA Removal)
產(chǎn)品規(guī)格:50次|100次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164094
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒是以mRNA或者總RNA為模板,高效合成鏈cDNA。本試劑盒使用BalbScript Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄酶,它的RNase H的活性與AMV反轉(zhuǎn)錄酶相比較低。該反轉(zhuǎn)錄酶可耐受42~50℃溫度。試劑盒中含有重組RNA酶抑制,可耐受55℃高溫,有效防止RNA降解。本制品含有去基因組成分gDNA Detergent,以RNA為模板進(jìn)行cDNA鏈合成時(shí),可以同步去除基因組DNA污染,反應(yīng)結(jié)束后,70℃加熱5分鐘,就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、gDNA Detergent。 試劑盒特點(diǎn): BalbScript反轉(zhuǎn)錄酶無(wú)RNase H活性,可避免鏈cDNA合成過(guò)程中,RNA/DNA雜交模板鏈中RNA降解,保證cDNA合成的質(zhì)量。 試劑盒中含去基因組成分,反轉(zhuǎn)錄時(shí)可同步去除基因組DNA污染。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類(lèi)、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專(zhuān)用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專(zhuān)人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專(zhuān)車(chē)。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
寡核苷酸探針?lè)峭凰?/span>AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交印跡試劑盒
寡核苷酸探針?lè)峭凰鼗瘜W(xué)發(fā)光法DNA南方雜交印跡試劑盒
寡核苷酸探針?lè)峭凰?/span>HRP-DAB顯色法DNA南方雜交印跡試劑盒
寡核苷酸探針?lè)峭凰?/span>AP-BCIP/NBT法DNA南方雜交印跡試劑盒
寡核苷酸探針?lè)峭凰?/span>AP-BCIP/NBT法DNA南方雜交印跡試劑盒
小鼠促卵泡素(FSH)elisa Cleroindicin D 189264-45-7 中文名: 分子式:C8H12O4 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 長(zhǎng)管大青; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
小鼠促卵泡素 英文名稱(chēng): Folliopin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): FSH Cleroindicin C 183626-28-0 中文名: 分子式:C8H12O3 度:% 關(guān)鍵詞: 長(zhǎng)管大青; 老鴉煙筒花; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
小鼠促卵泡生成激素 英文名稱(chēng): Mouse Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): FSH N-Benzoyl-L-glutamic acid 中文名:N-苯甲酰-L-谷 分子式:C12H13NO5
小鼠促甲狀釋放激素elisa 小鼠促甲狀釋放激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠促甲狀釋放激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促甲狀釋放激素試劑盒、小鼠促甲狀釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Cyasterone 中文名:杯莧甾酮 分子式:C29H44O8
小鼠促甲狀釋放激素(H)elisa Cleroindicin D 189264-45-7 中文名: 分子式:C8H12O4
第一鏈cDNA合成試劑盒(去除gDNA)拉帕替尼 L base 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠速激肽受體2(TACR2)elisa ,英文名: TACR2 ELISA Kit
左諾酮 Levonorgestrel 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP33,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 96T/48T
左諾酮 Levonorgestrel 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子2(FGF2)試劑盒 Bovine Heparin-binding growth factor 2,FGF2 ELISA kit
Levosulpiride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱(chēng)HumanBonemorphogeneticprotein4ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)4(BMP-4)規(guī)格:96T/48T
Levosulpiride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 動(dòng)物細(xì)胞/組織葡萄糖6-0酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5
L-甲狀鈉;四代甲狀鈉鹽,T4 Levothyroxine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR RatSolubleIercellularAdhesionMolecule1,sICAM-1elisa大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa規(guī)格:96T/48T
質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 小鼠速激肽受體1(TACR1)elisa ,英文名: TACR1 ELISA Kit
質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T
鹽酸 HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 牛甲狀(T4)試劑盒 Bovine thyroxine,T4 ELISA Kit
鹽酸 HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 英文名稱(chēng)HumanBonemorphogeneticprotein3ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)3(BMP-3)規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。