細胞名稱 家豬皮膚來源細胞品牌
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性家豬的耳部皮膚組織。由中科院昆明細胞庫于2015年建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶 無
染色體
使用權限 A類
家豬皮膚來源細胞品牌冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細胞傳代培養
一、原理 細胞在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。 傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分 瓶。
二、材料和試劑 1、細胞:貼壁細胞株 2、試劑:0.25%、1640培養基(含10%小牛血清) 3、儀器和器材:倒置顯微鏡,培養箱、培養瓶、吸管、廢液缸等
三、操作步驟 1、將長滿細胞的培養瓶中原來的培養液棄去。 2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底細胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時將棄去,加入10ml培養液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼,當見到瓶底發白并出現細針孔空隙時終止消化。一般室溫消化時間約為1—3分鐘。 4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,分到另外兩到三瓶中,實踐培養液塞好橡皮塞,置37℃下繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。 附:消化液配制方法: 稱取0.25克蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。 溶液中也可加入EDTA,使zui終濃度達0.02%。
茶葉 Camellia sinensis(L.)O.Kuntze Theophylline 58-55-9 C7H8N4O2 ≥98%
原柏部次減Thqoriginclstqmonidinq169234-82-45mg
毛冬青皂苷B1;毛冬青皂甙B1 Ilexsaponin B1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品侖安西林130534-200301含量測定
蘆薈寧 Aloenin 38412-46-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
58648-57-0 鋰標準品 200mg
野柏合減;單響尾蛇毒蛋白;大葉豬尿青Monocrotaline;monocrotalin;lobarpigurineplueHPLC≥99%,200mg/支
6,8-Diprenylorobol 6,8-DIPRENYLOROBOL 66777-70-6
Desogesel去氧孕烯標準品54024-22-550mg去氧孕烯標準品
氧化 54809-74-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
云木香Saussurea lappa Sulfocostunolide A 磺酸基木香烯內酯 A 1016983-51-9 C15H20O5S ≤90%
雙去氧基姜皇速Bisdqmqthoxycurcumin20mg/支
湖貝甲素;梭砂貝母減;新貝母減 Hupehenine 98243-57-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品舒巴坦130430-200305含量測定
Miaphylline帽柱葉堿純度:>98%
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-
A498 腎癌
F98-RFP-puro(慢病毒構建穩定株)大鼠腦膠質瘤細胞 F98-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (aa 1-146, His 標簽)
人骨骼肌星形細胞(HSkMSC)(5×105) CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse
小鼠原B細胞株;BaF3
CM-M096小鼠表皮角質形成細胞*培養基100mL
CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 淋巴瘤細胞,U-937細胞 NCI-N87(人胃癌細胞)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小細胞肺癌;NCI-H2227
KIT Others Human 人 KIT / c-KIT / CD117 (aa 540-972) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-R078大鼠大隱靜脈平滑肌細胞*培養基100mL
Ishikawa, 人子宮內膜癌細胞系 胚肺細胞,2BS細胞 SNU-398(人肝癌細胞)
C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-
TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照)
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。