巖羊肌肉來源細胞圖片冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細胞名稱 巖羊肌肉來源細胞圖片
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性巖羊的骨骼肌組織。由中科院昆明細胞庫于2015年建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶 無
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞傳代培養(yǎng)
一、原理 細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分 瓶。
二、材料和試劑 1、細胞:貼壁細胞株 2、試劑:0.25%、1640培養(yǎng)基(含10%小牛血清) 3、儀器和器材:倒置顯微鏡,培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等
三、操作步驟 1、將長滿細胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。 2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底細胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時將棄去,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼,當見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細針孔空隙時終止消化。一般室溫消化時間約為1—3分鐘。 4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,分到另外兩到三瓶中,實踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。 附:消化液配制方法: 稱取0.25克蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。 溶液中也可加入EDTA,使zui終濃度達0.02%。
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
可可Cocoa Theobromine 83-67-0 C7H8N4O2 ≥98%
右旋四輕巴馬汀cright-hcndqdfourxy7nogqnbcrMcin320-14-720mg
毛冬青皂苷甲;毛冬青皂甙甲 Ilexsaponin A1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定100883-200601常溫,避光100mg
靈芝酸B Ganoderic acid B 81907-61-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
水紅木Viburnum cylindricum Vibsanin C 葉含莢寧 C 74690-89-4 C25H36O5 ≥95%
野柏合減Monocrotclinq312--020mg
人參皂苷Rb1;人參皂甙Rb1 Ginsenoside Rb1 41753-43-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標準品人胰島素140633-200302RP-HPLC法效價測定
扁蓄苷;萹蓄苷 Avicularin 572-30-5 20mg HPLC≥98% 暫無簡介
107-41-5 己烯乙二醇標準品 125mg
花椒毒速;8-氧基補骨脂速;花椒毒Xanthotoxin;8-metxoxypsoralen;PepperVirus98-81-7HPLC≥98%,20mg/支
6α-xy7noxynidorellol 6ALPHA-輕基泥刀瑞爾醇 70387-38-1
Tioconazole Related Compound A相關(guān)物質(zhì)A標準品61709-33-9 25mg相關(guān)物質(zhì)A標準品
Milataxel 393101-41-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
家兔腎細胞;RABK3
CL-0129Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
AGS人胃腺癌細胞 結(jié)腸癌細胞,CoLo 320DM細胞 Saos-2(成骨肉瘤細胞)
人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23
CD200R1 Others Human 人 CD200R1 人細胞裂解液 (陽性對照)
野生型人c-kit受體細胞株;A7d
CM-M119小鼠晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細胞株 單核細胞型淋巴瘤細胞,THP 1細胞 FaDu(人咽鱗癌細胞)
大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6
SERPINA7 Others Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小細胞肺癌細胞;NCI-H209
PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0449SW 780(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2
2BS細胞,胚肺細胞 人前列腺癌細胞,VLcop細胞 人腎小管上皮細胞;HKC
獼猴皮膚細胞;MMS7
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照)