水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2品牌冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2品牌
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性河川型水牛的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2品牌細(xì)胞傳代培養(yǎng)
一、原理 細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng),同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分 瓶。
二、材料和試劑 1、細(xì)胞:貼壁細(xì)胞株 2、試劑:0.25%*、1640培養(yǎng)基(含10%小牛血清) 3、儀器和器材:倒置顯微鏡,培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等
三、操作步驟 1、將長(zhǎng)滿細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中原來(lái)的培養(yǎng)液棄去。 2、加入0.5—1ml 0.25%*溶液,使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細(xì)胞。隨著時(shí)間的推移,原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時(shí)將*棄去,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼,當(dāng)見(jiàn)到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)針孔空隙時(shí)終止消化。一般室溫消化時(shí)間約為1—3分鐘。 4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液,分到另外兩到三瓶中,實(shí)踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。 附:消化液配制方法: 稱取0.25克*蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無(wú)Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過(guò)濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。 *溶液中也可加入EDTA,使zui終濃度達(dá)0.02%。
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2品牌注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
鉤藤Uncaria sessilifructus 3,6,19-ixy7noxy-23-oxo-12-ursen-28-oic acid 3,6,19-三羥基-23-氧代-12-烏蘇烯-28-酸 131984-82-2 C30H46O6 ≥95%
1,3-二咖非酰奎寧醋1,3-twoccffqoylinoneicccidHPLC≥98%,20mg/支
金雀花減;野靛減 Cytisine 485-35-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品*130484-200502含量測(cè)定
錄化芍藥素
6108-05-0 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 100mg
異甘草苷;異甘草甙Isoliquiritin;isoliquiritin2041-81-6HPLC≥98%,20mg/支
7-O-Acetyl-4-O-demetxylpolysyphorin 7-O-乙酰基-4-O-去甲基樟葉素 89706-39-8
*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品102625-64-9 25mg*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
假荊芥屬苷 569-90-4 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
木豆Cajanus cajan Pyrocatechol monoglucoside 兒茶酚-O-BETA-D-葡萄糖甙 2400-71-7 C12H16O7 ≥98.5%
10-羥基喜樹(shù)減10-xy7noxyccmptothqcinHPLC≥98%;20mg/支
靈芝酸A Ganoderic acid A 81907-62-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材白前(柳葉白前)121442-200501TLC法鑒別
Lignans亞麻木酚素(SDG)純度:≥98%
PNLIP Others Human 人 PNLIP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615
MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]人骨肉瘤細(xì)胞 The MNNG/HOS Cl #5 human osteosarcoma cell line [R-1059-D] MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
HEB細(xì)胞,人腦膠質(zhì)細(xì)胞株(正常) 大腸埃希氏菌 人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHBSMC NA
RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474
QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞
SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,Hs 683細(xì)胞 RF/6A(猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino
FUT10 Others Human 人 FUT10 / Fucosylansferase 10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2品牌人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]
DNASE1 Others Human 人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Mv1Lu細(xì)胞,貂肺上皮細(xì)胞 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞,HEL細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
鯉魚(yú)尾鰭細(xì)胞;YZ16
NBL1 Others Human 人 DAN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)