【產品名稱】:PE標記PCNP,PEST含核蛋白抗體供應
【產品規格】:50ul/0.1ml/0.2ml
【產品價格】:詢價(電詢或客服.郵件)
【抗體來源】:rat.Rabbit OR Mouse
【產品用途】:科研實驗,用于免疫組化實驗,WB實驗,相應的標記抗體有HRP標記抗體,FITC標記,BIO等。
【性 狀】: Lyophilized or Liquid
【濃 度】: 1mg/1ml
【亞 型】: IgG
【貯 存】: 貯存于-20℃.
【相關標記】:HRP Biotin Gold RBITC AP FITC Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 APC Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647
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PE標記PCNP,PEST含核蛋白抗體供應 免疫組化問題解答:
1 染色過強
原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時間過長 降低抗體滴度、抗體孵育時間:室溫1小時或4度過夜
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度
c DAB顯色時間過長或濃度過高 顯色時間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準
2 非特異性背景染色
原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步沖洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長
c 組織中含內原性* 正常非免疫動物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時間
3 染色弱
原因 解決方法
a 抗體濃度過低、孵育時間過短 提高抗體濃度、孵育時間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時間 應更換試劑
c 操作中添加試劑時緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液
使試劑稀釋 (應防止切片干燥)
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘
4 染色陰性
原因 解決方法
a 操作步驟錯誤 應重試 設陽性對照
b 組織中無抗原 設陽性對照以驗證試驗結果
c 一抗與二抗種屬連接錯誤 仔細確定一抗二抗種屬無誤。
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*組織固定的注意事項*
武漢友聯特生物技術有限公司實驗室提供注意事項:如何組織固定。
1. 固定液的量
固定組織時必須有足夠的固定液,一般為組織塊體積的10~15倍。固定用的容器必須足夠大,組織材料不要太多,避免組織中的水分滲出而影響固定液的濃度。
2.固定的組織必須新鮮
組織取材后應立即固定。特別是在夏季,標本不及時固定,組織易收縮變形,并發生自溶現象。一般組織在離體30分鐘內固定。
3.組織塊的體積
組織塊的體積宜小而薄,一般用于免疫組化的組織大小宜為1.0cmX1.0cmX0.2cm。組織太大,內部得不到充分固定,導致組織結構破壞,給切片帶來一定的困難,還增加非特異染色,同時浪費試劑。
4.固定時間
固定時間要視組織塊大小及固定液的種類、濃度、溫度而定。組織塊越大,固定時間越長;反之,組織塊越小,固定時間越短。固定液的穿透力與濃度成正比,固定的時間與溫度成反比。總之,固定的時間應根據條件而定。
5. 組織固定后的沖洗
組織固定后,因固定液滲到組織中,所以必須*沖洗,除去固定液,否則會影響下一步的脫水。特別對于長時間固定的標本應用流水沖洗,盡可能減少色素沉著。對于混合固定液固定的組織,更要及時沖洗,否則將影響免疫組化切片的質量。
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