貨號(hào): WT-E6052 產(chǎn)品名稱(chēng): 纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒
規(guī)格:48T/96T
上海蔚霆生物科技有限公司*提供各種種屬、各種系列ELISA檢測(cè)試劑盒,價(jià)格實(shí)惠,質(zhì)量有保證,信譽(yù)*。索取各ELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。凡購(gòu)買(mǎi)目錄本公司ELISA檢測(cè)試劑盒可免費(fèi)提供代測(cè)服務(wù)。如需訂購(gòu),請(qǐng)點(diǎn)擊左上角的()進(jìn)行咨詢(xún)
Elisa試劑盒組成:
說(shuō)明書(shū):1份,封板膜 2片 密封袋 1個(gè) ,酶標(biāo)包被板:1(2-8℃保存)
標(biāo)準(zhǔn)品:1瓶 (2-8℃保存),標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1瓶(2-8℃保存)
酶標(biāo)試劑:1瓶(2-8℃保存),樣品稀釋液:1瓶(2-8℃保存)
顯色劑A液:1瓶 (2-8℃保存),顯色劑B液:1瓶 (2-8℃保存)
終止液:1瓶 (2-8℃保存),濃縮洗滌液:1瓶 (2-8℃保存)
Elisa試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為60μg/L,40μg/L ,20μg/L,10μg/L,5μg/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
12. 品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,輕輕晃動(dòng)混勻。
13. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
14. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
15. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
16. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
17. 溫育:操作同3。
18. 洗滌:操作同5。
19. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
20. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
21. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
Elisa試劑盒檢測(cè)范圍:(請(qǐng))
Elisa試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
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