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【產品名稱】:Anti-Unstained抗體說明書現貨
【規 格】:0.1ml/0.2ml
【相關標記】:Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647 AP APC Biotin Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 FITC Gold HRP PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 RBITC
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來源】:Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產品類型】:一抗
【性 狀】:Lyophilized or Liquid
【亞 型】:IgG
【純化方法】:affinity purified by Protein A
【保存條件】:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
連續使用時4°C存儲,保質期六個月,*存儲時建議分裝為10ul以上小包裝-20°C存儲,并避免反復凍融,保質期一年。
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現SYN80050.2.2 石蠟切片中性脂質尼羅紅直接染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80050.3 冰凍切片中性脂質尼羅紅染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80051.1 細胞中性脂質蘇丹黑染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80051.2.1 石蠟切片中性脂質蘇丹黑間接染色試劑盒 10次 750.00
現SYN80051.2.2 石蠟切片中性脂質蘇丹黑直接染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80051.3 冰凍切片中性脂質蘇丹黑染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80061.1 細胞中性脂質油紅O染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80061.2.1 石蠟切片中性脂質油紅O間接染色試劑盒 10次 750.00
現 SYN80061.2.2 石蠟切片中性脂質油紅O直接染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80061.3 冰凍切片中性脂質油紅O染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80057.1 細胞總*高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80057.2.1 石蠟切片總*高氯酸萘醌(PAN)間接染色試劑盒 10次 750.00
現 SYN80057.2.2 石蠟切片總*高氯酸萘醌(PAN)直接染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80057.3 冰凍切片總*高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒 50次 750.00
現SYN80057.4 細胞游離*毛地黃皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌
(PAN)染色試劑盒 50次 950.00
現SYN80057.5.1 石蠟切片游離*毛地黃皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)間接染色試劑盒 10次 950.00
SYN80057.5.2 石蠟切片游離*毛地黃皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)直接染色試劑盒 50次 950.00
SYN80057.6 冰凍切片游離*毛地黃皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒 50次 950.00
現SYN80058.1 細胞總*舒爾茨染色試劑盒 50次 750.00
免疫熒光技術的實驗步驟
1. 直接免疫熒光法測抗原
⑴基本原理
將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。
⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標記的抗體溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進行稀釋緩沖甘油:分析純無熒光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸鹽緩沖液1份配制搪瓷桶三只(內有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有蓋搪瓷盒一只(內鋪一層浸濕的紗布墊)熒光顯微鏡玻片架濾紙37℃溫箱等。
⑶實驗步驟
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
⑷注意事項
1)對熒光標記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應超過1:20,抗體濃度過低,會導致產生的熒光過弱,影響結果的觀察。
2)染色的溫度和時間需要根據各種不同的標本及抗原而變化,染色時間可以從10 min到數小時,一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于37℃可加強染色效果,但對不耐熱的抗原(如流行性乙型腦炎病毒)可采用0-2℃的低溫,延長染色時間。低溫染色較37℃30 min效果好的多。
3)為了保證熒光染色的正確性,*試驗時需設置下述對照,以排除某些非特異性熒光染色的干擾。
① 標本自發熒光對照:標本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特異性對照(抑制試驗):標本加未標記的特異性抗體,再加熒光標記的特異性抗體。
③ 陽性對照:已知的陽性標本加熒光標記的特異性抗體。
如果標本自發熒光對照和特異性對照呈無熒光或弱熒光,陽性對照和待檢標本呈強熒光,則為特異性陽性染色。
4)一般標本在高壓汞燈下照射超過3min,就有熒光減弱現象,經熒光染色的標本在當天觀察,隨著時間的延長,熒光強度會逐漸下降。
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